Entrega direcionada de um PD

BMC Medicine volume 21, número do artigo: 327 (2023) Citar este artigo

Detalhes das métricas

O CD133 é considerado um marcador de células-tronco cancerígenas (CSCs) em vários tipos de tumores, incluindo o carcinoma hepatocelular (CHC). Células T específicas do receptor de antígeno quimérico (CAR-T) direcionadas a CSCs positivas para CD133 surgiram como uma ferramenta para o tratamento clínico do CHC, mas a imunogenicidade, o alto custo de vetores virais recombinantes de grau clínico e a potencial mutagênese insercional limitam sua aplicação clínica .

Células CAR-T específicas para CD133 secretando scFv bloqueador de PD-1 (células CD133 CAR-T e PD-1) foram construídas usando um sistema de transposon da bela adormecida da tecnologia de minicírculo e a eficácia antitumoral de CD133 CAR-T e PD-1 As células foram analisadas in vitro e in vivo.

Uma análise univariada mostrou que a expressão de CD133 em pacientes do sexo masculino no estágio tardio (II e III) foi significativamente associada a pior sobrevida livre de progressão (PFS) (P = 0,0057) e sobrevida global (OS) (P = 0,015), e uma a análise multivariada mostrou tendência a pior OS (P = 0,041). Pacientes do sexo masculino com CHC avançado exibiram um escore positivo combinado (CPS) PD-L1 aproximadamente 20 vezes maior em comparação com aqueles com CHC em estágio inicial. Geramos com sucesso células CD133 CAR-T e PD-1 que poderiam secretar scFv bloqueador de PD-1 com base em um sistema de bela adormecida envolvendo vetores de minicírculos. As células CD133 CAR-T e PD-1 exibiram atividade antitumoral significativa contra HCC in vitro e em modelos de xenoenxerto de camundongos. Assim, as células CD133 CAR-T e PD-1 podem ser uma estratégia terapeuticamente tratável para atingir CSCs positivas para CD133 em pacientes do sexo masculino com CHC avançado.

Nosso estudo fornece uma estratégia não viral para a construção de células CAR-T que também poderiam secretar inibidores de bloqueio de checkpoint com base em um sistema da Bela Adormecida a partir de vetores de minicírculos e revelou um benefício potencial desta estratégia para pacientes do sexo masculino com CHC avançado e alta expressão de CD133 (pontuação mediana de imuno-histoquímica > 2.284).

Relatórios de revisão por pares

O carcinoma hepatocelular (CHC) é a malignidade hepática primária mais comum e a terceira principal causa de morte relacionada ao câncer em todo o mundo [1]. Apesar da avaliação de muitas quimioterapias e agentes terapêuticos direcionados, os únicos tratamentos comprovados para doenças avançadas são sorafenibe, regorafenibe e lenvatinibe, e os benefícios de sobrevida global são modestos [2]. Recentemente, dois inibidores da proteína 1 de morte celular programada (PD-1), pembrolizumabe [3] e nivolumabe [4], foram aprovados para tratamento de CHC em pacientes que apresentaram progressão após tomar sorafenibe, mas suas taxas de resposta (aproximadamente 20%) também foram insatisfatório [5]. Assim, é urgentemente necessária uma nova estratégia de tratamento que melhore os benefícios clínicos do CHC.

A recorrência e a metástase são eventos frequentes e esperados após terapia sistêmica em pacientes tratados com tratamentos atuais para CHC avançado. Evidências emergentes sugerem que a maioria das terapias sistêmicas só podem diminuir a carga tumoral primária porque as células-tronco cancerígenas (CSCs) possuem mecanismos intrínsecos para resistir à terapia tradicional ou nova, e as CSCs em repouso são responsáveis ​​pela iniciação, recorrência e metástase do tumor [6, 7]. Juntamente com a presença de células semelhantes a células-tronco de CHC positivas para CD133 [8], um número crescente de estudos indica que a expressão de CD133 está correlacionada com tumores em estágio mais avançado e mau prognóstico em pacientes com CHC [9, 10], sugerindo uma estratégia promissora de usando CD133 como alvo para tratamento de CHC. Células T específicas do receptor de antígeno quimérico (CAR-T) direcionadas a CSCs positivas para CD133 surgiram como uma ferramenta para o tratamento clínico do CHC (NCT02541370).

A terapia imunológica baseada em células CAR-T para câncer é baseada na integração estável de um transgene no genoma do hospedeiro, de modo que a progênie geneticamente modificada infundida possa fornecer efeitos terapêuticos de longo prazo. Até o momento, a maioria das terapias com células CAR-T são produzidas através de sistemas tradicionais de vetores virais que têm sido usados ​​extensivamente e com segurança para inserir transgenes em células T, mas a imunogenicidade, o alto custo dos vetores virais recombinantes de grau clínico e o potencial para mutagênese insercional limitam sua aplicação clínica [11, 12]. Os sistemas de transferência de genes não virais são alternativas atraentes aos métodos atuais de produção de células CAR-T. As alternativas mais comuns aos vetores virais são os transposons. Uma variedade de sistemas baseados em transposons foram relatados para a produção de células CAR-T, e esses sistemas fornecem menor imunogenicidade, perfis de segurança aprimorados e custos reduzidos para a fabricação de células CAR-T com GMP. Das tecnologias disponíveis agora em ensaios clínicos, o sistema de transposão da Bela Adormecida (SB) experimentou o desenvolvimento mais rápido desde o início até a aplicação em humanos [13]. Minicírculos (MCs) são vetores de DNA superenrolados que constituem uma nova alternativa aos plasmídeos como fontes de transposases e transposons SB. Em comparação com os plasmídeos convencionais, os MCs não possuem sequências de estrutura bacteriana e genes de resistência a antibióticos, resultando em níveis mais estáveis ​​e mais elevados de expressão genética transitória quando transfectados em células de mamíferos [14, 15].